检验标本留取和采集要求
一 尿液标本的留取
1. 尿常规（RT）、尿沉渣、尿妊娠（hCG）试验
取清洁干燥一次性尿杯一个（如在家中留取，容器应清洁干燥，不含任何药物），留取新鲜中段尿（连续排尿不中断，此时截取中段排的尿）作为送检样品约10-12ml，倒入一次性尿管内。标本以清晨第一次为宜，清晨第一次尿液为浓缩尿，各种有形成分及激素（如hCG）含量较高，易于检出，但尿常规和尿hCG也可随时留取。标本留取前最好清洁尿道口及外阴，同时避免经血、白带、精液、粪便等混入污染；容器中应尽量避免药物和各种消毒剂的存在，防止破坏标本中各种有形成分的形态及激素活性。
标本送达最佳时间为半小时以内，最长不要超过2小时，否则造成：
（1）尿中细菌生长繁殖，导致：
① 尿素酵解，使尿pH升高，有形成分被破坏（管型分解、红细胞溶解）；
② 葡萄糖被降解，使病理性糖尿消失；
③ 细菌菌体蛋白与病理性蛋白尿相互干扰。
（2）尿中的化学成分（尿胆原）可因尿久置而变性、分解。
尿中盐类因久置而析出结晶干扰显微镜检查，从而影响尿液的结果判断。
2. 乳糜尿标本
用于丝虫病和某些肿瘤病人的诊断。尿标本可随时留取，注意事项同尿常规标本，切忌混有油迹。
3. 24小时尿标本
24小时尿标本可用于检测24小时尿生化电解质（U-K、U-Na、U-Cl、U-Urea、U-Cr和24小时尿蛋白（U-Pro）定量，需添加防腐剂；24小时U-Ca、U-P，24小时尿轻链检查不可添加防腐剂。
准备清洁干燥大容器（最好有盖）。在第一次留尿时将防腐剂倒入容器中，并与尿液混匀。病人于清晨7时 排尿弃去，以后每次尿均收集于容器中，至次日晨7时最后一次所排尿液也收入容器中。测量尿液总量，以毫升（ml）或升（L）表示，并记录在化验单正面明显位置。将全部尿液充分混匀后，取4ml左右倒入5ml带盖小试管/防腐剂小管内，并用透明胶带粘贴化验单立即送检。
标本留取过程中应避免混有血、脓或阴道分泌物等可引起“假性蛋白尿”的成分。24小时尿标本收集过程中最好放置2~8℃冰箱中冷藏保存，以减少微生物生长，维持尿液pH的恒定，如无条件也可放置于阴凉通风处。
4. 尿普通培养及厌氧培养
准备无菌小瓶。患者自己留取标本时，先以肥皂水清洁外阴；也可由护士完成清洁消毒工作，程序如下：用0.1％新洁尔灭消毒尿道口及外阴（女性用棉球蘸消毒液，以尿道口为中心，自上而下、自内而外擦洗尿道口、小阴唇及大阴唇2次。男性应将包皮翻上，用棉球蘸消毒液，以尿道口为中心，向外旋转擦洗2次，注意洗净包皮及冠状沟；棉球不可往返使用），然后用无菌棉球擦干，并由病房或治疗室护士完成尿道口及外阴消毒。消毒后，病人自行排尿，尿流不要中断，排尿过程中，将前段尿弃去，用无菌小瓶接中段尿，盖好瓶盖立即送检。注意尿中勿加防腐剂。
6. 抗酸染色、分枝杆菌培养
留尿前晚尽量少饮水。取清洁容器收集清晨第一次全部尿液或24小时尿液沉淀10～15ml送检。注意勿加防腐剂。
二 粪便标本的留取
1. 粪便常规 （RT）及隐血（或称潜血，OB）试验
用竹签挑取少许新鲜粪便（约蚕豆大小），应选择其中有脓血、粘液的部分或颜色异常部分，如无异常，则可自粪便表面不同部位及粪便深处多部位取材，放入干燥清洁有盖的蜡纸盒或塑料盒内立即送检，一定不要超过2小时。
注意事项：
（1）使用新鲜标本，采集后立即送检。标本久置可因pH及消化酶等因素而使粪便中细胞成分分解破坏。
（2）标本中不可混有尿液，更不可从尿壶或便盆中采取粪便标本，因为尿液可使粪中柔弱的原虫致死。
（3）粪便标本中也不可混入植物、泥土、污水等，因腐生性原虫、真菌孢子、植物种子、花粉易混淆实验结果。
（4）无粪便而又必须检查时可经肛门指诊获取粪便。灌肠后的粪便常因过稀及混有油滴等而不适于作检查标本。
（5）粪便标本不应用卫生纸包裹，应直接装入蜡纸盒或塑料盒，以防水分丢失细胞被破坏。
2. 粪便寄生虫检查标本
（1）检查寄生虫卵标本留取方法及注意事项同便常规检查。
（2）检查阿米巴滋养体应于排便后立即从脓血性或稀软部分取材，迅速（2小时内）送检，患者在家中留取标本时，送检过程中应采取保温措施，因为阿米巴原虫可在低温下失去活动力从而不宜查到。
（3）检查蛲虫卵时，在清晨排便前自肛门四周皱襞处拭取标本，尽快（2小时内）送检。
3. 粪便培养标本
准备无菌便盒。采集新鲜粪便标本的过程应尽量无菌操作。①直肠拭子法：用无菌拭子蘸生理盐水湿润，由肛门插入约6～7cm，轻轻在直肠内旋动取出大便少许，放入无菌便盒中，加盖封口送检。②自然排便法：病人在清洁便盆内排便，用竹签挑取大便中脓血或粘液部分（约栗子大小，2~3g；液体粪便取絮状物2~3ml），放入无菌便盒中送检。
注意所挑取的大便不应接触其它部位，如便盆。注意尽可能在使用抗生素使用之前收集粪便，粪便标本中不可混入尿液及其它异物。
三 血液标本的采集
1. 静脉血标本
静脉血标本是医护人员采用真空采血技术，从患者肘静脉或其它部位的静脉取血。在取得静脉血标本时应注意：
（1）在肌肉注射或静脉输含有葡萄糖或电解质（含钾、钠、氯离子）的液体时，建议3小时以后采集静脉血标本进行这些项目的检验，以防止上述检验项目因输液引起的假性升高。如因抢救等原因需要在输液同时采血的，一定要在输液对侧采集标本，医生应正确评价检测结果。禁止从中心静脉插管、肝素帽等保留的治疗通道中采集血液标本。
（2）止血带使用时间应少于1分钟（建议在针头穿刺进入血管后即放松止血带），以免引起血液淤滞，局部组织缺氧，造成血液某些成分的改变，特别是测定乳酸时不可使用止血带，否则结果偏高。
（3）血标本应防止溶血。引起溶血的原因有 ①注射器采血时抽吸力太大；② 血液与抗凝剂比例失调；③ 混匀标本时过度振荡；④ 注射器或盛血容器带水或容器污染；⑤全血放置时间长或突然受冷或受热；⑥注射器中的血沫注入试管；⑦真空采血时如未采满至相应刻度，可由于残存负压造成红细胞破裂；⑧不拔针头直接注入采血管；⑨标本离心时离心力过大等等。
因血液中红细胞内外成分有很大差异，溶血可造成红细胞内的物质向细胞外转移，如K+、Mg2＋和某些酶类（LD、AST、ALT、ACP）；另外，溶血还可干扰某些化学项目（如TBil、DBil、TC等）的测定，严重影响结果的准确性。
（4）正确选择采血管。通常情况下临床检验多采用血清为标本（不抗凝），但一些特殊检验项目需要使用抗凝剂时，应注意选择合适的抗凝剂并注意抗凝剂与血液的比例，以防止标本凝血或红细胞形态的改变；抗凝血标本采集后立即轻轻摇匀（上下颠倒8次），以防凝血发生。正确采血管选用请参照《检验科项目组合及标本保存运输时间表》。
（5）注意标本存放环境温度最好在15～25℃。未经离心的标本不要冷藏，因为骤冷骤热可能引起标本溶血或细胞形态改变。标本应避免日光直接照射，防止如胆红素、尿酸等对紫外线敏感的物质因曝光而含量降低；标本采集后应尽快送检。
（6）在采集静脉血标本前病人应注意的问题：
①避免剧烈运动 强烈肌肉运动明显影响体内代谢，引起血中某些成分浓度的改变，如乳酸、CK、AST、LD、ALP等升高，故一般主张抽血前24小时内不做剧烈运动。清晨取血，住院病人可在起床前取血，匆忙赶到门诊的人应至少休息15分钟后取血。
②注意合理饮食 除了急诊或其它特殊原因外，一般主张正常饮食3天后采血，应避免暴饮暴食及刻意控制饮食。应在空腹10～14小时后第二天清晨采血。餐后或延长空腹时间（饥饿）均可引起血液化学成分的改变。餐后血糖、血钾、碱性磷酸酶及甘油三酯通常升高，无机磷降低；饥饿时血糖及蛋白质降低、胆红素升高；另外饮食的量及质对检验结果也有影响，如高蛋白饮食可使血清尿素氮、血氨、尿酸升高；高脂肪饮食引起乳糜微粒血症，导致血清脂血（混浊）；饮水过多或过少可使血清稀释或浓缩；含咖啡因的饮料可使儿茶酚胺释放等。
③饮酒的影响 饮酒后即刻导致血清乳酸、尿酸升高；连续饮酒导致AST、ALT上升，而GGT上升最为明显。长期饮酒者往往有高甘油三酯血症，GGT也会长期异常。
④情绪影响 避免紧张、情绪激动，否则可以影响神经－内分泌功能检验项目。急促呼吸可使血清乳酸等升高。
⑤药物影响 很多药物进入人体后可使某些化验项目的结果增高或降低，如咖啡因可使血糖和胆固醇增高；冠心平可使甘油三酯和乳酸脱氢酶降低；维生素C可使乳酸脱氢酶降低；口服避孕药可使转氨酶升高等。故病人在化验前应尽可能停服对检验有干扰的药物。
⑥取血时体位的影响 体位（站立、坐位、卧位）改变可以引起某些化验指标的显著变化，故建议坐位5分钟后取血为宜。
2.动脉血标本
（1）采集方法 动脉血标本采集使用一次性肝素化注射器，从患者股动脉、肱动脉或桡动脉取血，血抽出后用一块小橡皮封针头以隔绝空气，并将注射器放在手中双手来回搓动，使血液和抗凝剂充分混匀，立即送检。
（2）动脉血标本采集注意事项
①抽血过程中出现的小气泡须在抽血后立即排出，然后隔
绝空气对于保证结果的真实性极其重要。空气中的氧分压高于动脉血，二氧化碳分压低于动脉血。气体从高分压流向低分压，使血液中pO2及pCO2都改变，检测结果不能真实反映体内状况。
②血气标本应尽快送检（2～8℃冷藏情况下不超过30分钟）。抽血后，由于血细胞还在继续新陈代谢，使pH、pO2下降，pCO2升高，时间过长影响结果的真实性。
3. 血培养标本
（1）采集方法 采用无菌操作技术用注射器抽取患者静脉血，成人：20～30ml；婴幼儿：1～5ml，并立即注入血培养瓶中（成人常规用需氧、厌氧两种培养瓶各注入8～10ml静脉血，婴幼儿只注需氧儿童瓶），轻摇混匀，室温下2小时内送检。
（2）血培养标本注意事项
①标本采集时间应在病人发热初期，并且要在用抗生素之前，只有这样才能得到较高的阳性率。若已用药应注明，且在下次用药前采集标本。
②大多数的菌血症是间歇性的，往往需要以反复多次血培养阳性来证实。
③采血量一般为培养基的1/5～1/10，婴幼儿采血1～5ml；亚急性感染性心内膜炎及布氏杆菌病，要多次采血和增加采血量。
④采血过程中应严格无菌操作，避免污染。
⑤注意血培养瓶的选择。常规用普通需氧、厌氧培养瓶，已使用抗生素的患者用加活性炭的需氧、厌氧培养瓶。
⑥标本在送检过程中千万不要打开瓶塞，不要将标本中的液体倾倒，以避免空气中细菌污染标本，同时杜绝传染性标本污染环境。
⑦化验申请单一定要完整清楚，特别是标本来源、是否用过抗生素、采样时间、临床诊断等，有利于化验室综合分析判断，得出准确结论。
⑧实验室根据标本来源和可能存在的病原菌确定选用各种分离培养基及孵育环境，以期提高细菌检验的准确性。
四 精液标本
患者检查前5～7日内应禁欲（无性交、手淫及遗精），即5～7日内未排精。检查日患者通过手淫法或体外排精法将精液全部射于清洁干燥的玻璃或塑料容器内，勿遗漏。取得标本后应于30分钟内立即送检，因为精液中纤溶酶的作用，精液离体30分钟可自行液化，超过1小时精子活动度降低。天冷时标本要保温送检，因温度低于20°C影响精子活力。不能用乳胶避孕套采集精液，因避孕套内的滑石粉可杀死精子或抑制精子活力，影响检验结果的准确性。因精子生成数目变化范围较大，精液常规检查若出现一次异常结果，应隔1周后复查，连续检查2～3次。标本送检时需注明采取时间和前次排精日期。
五 痰液标本
1. 痰涂片及痰培养
准备无菌痰盒或痰杯。一般检查应采集清晨第一口痰为宜。患者晨起用清水反复漱口，然后用力咯出气管深处痰液，盛于无菌痰杯内，盖紧盖，立即送检（不应超过2小时），以免细胞和细菌自溶。注意标本内切勿混入唾液及鼻咽分泌物。
对无痰、少痰或痰脓不易咯出者，可用45°C加温生理盐水（0.9％NaCl）雾化吸入后留取；对于小儿可轻压胸骨柄上方以诱导咯痰。
2. 痰液的细胞学检查或找痰瘤细胞
于上午9～10时用力咯出气管深处痰液（清晨第一口痰在呼吸道停留时间长，细胞变性结构不清），盛于专用痰杯内立即送检，应尽量送含血的病理性痰液。
六 前列腺液标本
医生通过肛门指诊，用前列腺按摩法采集前列腺液。在嘱病人排尿后，先自上而下纵向按摩前列腺左右两叶各2～3次，或从前列腺的两侧向中间沟各按摩2～3次（不可往返按摩），再挤压会阴部尿道，使前列腺液从尿道口滴出。直接将前列腺液（第一滴弃去）滴于载玻片上及时送检。如需做细菌培养，应先消毒尿道口（方法详见尿培养标本采集），用无菌干燥容器收集标本。前列腺急性炎症、结核、脓肿或肿瘤则禁忌按摩，以免引起播散。一次按摩失败或检验结果阴性，如有临床指征，需隔3～5天后再重复按摩采集。
七 脑脊液标本
脑脊液标本一般由医生通过腰椎穿刺术（腰穿）获得。采集的脑脊液分别收集于3只无菌小瓶内，每瓶0.5～1ml。第一瓶可用于细菌学检查,第二瓶用于生化及免疫学检查,第三瓶用作细胞学检查。注意第一瓶标本应保温送检（20°C），不可置冰箱保存，否则会使病原菌死亡，尤其是脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌及流感嗜血杆菌。第三瓶应避免标本凝固，遇高蛋白标本时，可用EDTA盐抗凝。
标本采集后应立即送检（1小时内），以免放置过久细胞破坏，影响细胞计数及分类；葡萄糖分解，使糖含量降低（若要保存较长时间，应加入氟化钠抗凝）；病原菌破坏或溶解，影响细菌检出率；凝块形成，影响细胞计数等等，使检验结果不准确。
八 阴道分泌物标本
阴道分泌物俗称“白带”，由医生借助阴道窥器，于阴道后穹隆采集，并将阴道分泌物用生理盐水涂片后立即高倍镜检查其清洁度；革兰氏染色油镜查找淋病奈瑟菌、白色念珠菌、阴道加特钠菌等。
取分泌物前24～48小时避免性交、阴道灌洗或局部用药，不作双合诊检查。取分泌物时阴道窥器不涂润滑油（必要时可涂生理盐水润滑），以免影响检查结果。阴道滴虫在25～42°C下可活动，故标本应保温送检。沙眼衣原体直接涂片需用无水乙醇固定后送检。
九 浆膜腔积液标本
人体的胸腔、腹腔、心包腔等统称浆膜腔。正常情况下，腔内含有少量液体起润滑作用；在病理情况下可发生积液，称浆膜腔积液。浆膜腔积液由医生采用穿刺术而获得。医生根据病情及穿刺目的，确定检查部位（胸腔、腹腔、心包腔等），患者采取相应的体位配合，然后医生采用无菌操作，选择穿刺点，穿刺抽吸积液。
十 唾液标本
采集唾液标本时，患者先用温水漱口，漱毕5～10分钟后采集。根据病情需要可以采集单一腺体的或所有腺体的混合液，后者更为常用。采集时，可直接使用导管自各腺体的开口处吸取，或将自然流出的唾液收集在干净试管内，离心分离，吸取上清液供检验。如果病人不易自然流出唾液，可将（1）少量消毒脱脂棉球放入患者舌下数分钟，取出棉球挤压得到唾液；（2）嘱患者咀嚼石蜡或橡皮圈来刺激唾液的分泌。采集方法（刺激和无刺激采集唾液）不同，其成分浓度也不同，应加以注明。在采集测定唾液治疗药物浓度的标本时，应注意避免口服药物在口腔内残留造成的污染而使结果偏高的问题。
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